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標(biāo)準(zhǔn)品的配制與稀釋注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2025-12-09      點(diǎn)擊次數(shù):60
  標(biāo)準(zhǔn)品是實(shí)驗(yàn)室定量分析、方法驗(yàn)證的核心參考物質(zhì),其配制和稀釋的規(guī)范性直接決定檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文整理了一套簡(jiǎn)單易懂、可直接落地的操作注意事項(xiàng),幫助實(shí)驗(yàn)人員規(guī)避常見(jiàn)誤差,保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可靠。
 
  一、配制前的準(zhǔn)備注意事項(xiàng)
 
  標(biāo)準(zhǔn)品的預(yù)處理
 
  平衡至室溫:從冷藏 / 冷凍環(huán)境取出的標(biāo)準(zhǔn)品,需在室溫下放置30~60 分鐘,使其與實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫度一致,避免因溫度差異導(dǎo)致稱(chēng)量時(shí)吸潮或體積誤差。
 
  開(kāi)封與分裝:首次開(kāi)封的標(biāo)準(zhǔn)品需按最小使用量進(jìn)行分裝,避免反復(fù)凍融(尤其是生物類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)品);分裝時(shí)使用無(wú)菌、無(wú)酶的一次性離心管,做好標(biāo)簽標(biāo)注(名稱(chēng)、濃度、分裝日期、有效期)。
 
  純度確認(rèn):使用前核對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品證書(shū),確認(rèn)其純度、水分、雜質(zhì)含量等指標(biāo),若為含結(jié)晶水的標(biāo)準(zhǔn)品,需在計(jì)算配制濃度時(shí)計(jì)入結(jié)晶水比例,避免濃度偏差。
 
  器具的準(zhǔn)備與校準(zhǔn)
 
  量具選擇:根據(jù)配制體積選擇合適精度的器具,如配制 10mL 以下溶液用移液槍 / 移液管(A 級(jí)精度),100mL 以上用容量瓶;嚴(yán)禁用普通量筒進(jìn)行精準(zhǔn)配制。
 
  器具清潔:所有接觸標(biāo)準(zhǔn)品的器具需用超純水清洗 3 遍以上,有機(jī)類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)品還需用對(duì)應(yīng)有機(jī)溶劑潤(rùn)洗,避免殘留雜質(zhì)污染標(biāo)準(zhǔn)品。
 
  校準(zhǔn)核查:定期校準(zhǔn)移液槍、容量瓶等器具,確保其誤差在允許范圍內(nèi),校準(zhǔn)記錄需留存?zhèn)洳椤?br /> 
  溶劑的選擇與處理
 
  匹配標(biāo)準(zhǔn)品特性:水溶性標(biāo)準(zhǔn)品優(yōu)先用超純水(電阻率≥18.2MΩ?cm)配制;脂溶性標(biāo)準(zhǔn)品需選擇對(duì)應(yīng)有機(jī)溶劑(如甲醇、乙腈、正己烷),且溶劑需為色譜純或分析純以上級(jí)別。
 
  溶劑預(yù)處理:易揮發(fā)溶劑需在通風(fēng)櫥內(nèi)操作,避免溶劑揮發(fā)影響濃度;含緩沖體系的溶劑需提前調(diào)節(jié) pH 值至要求范圍,且現(xiàn)配現(xiàn)用,防止緩沖能力失效。
 
  二、稱(chēng)量與定容的操作注意事項(xiàng)
 
  稱(chēng)量環(huán)節(jié)
 
  天平選擇:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的稱(chēng)量范圍選對(duì)應(yīng)精度天平,如毫克級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品用十萬(wàn)分之一分析天平,克級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品可用萬(wàn)分之一天平。
 
  防吸潮與防揮發(fā):易吸潮的標(biāo)準(zhǔn)品需在干燥器內(nèi)快速稱(chēng)量;易揮發(fā)的液體標(biāo)準(zhǔn)品需用封口膜密封稱(chēng)量瓶,減少揮發(fā)損失。
 
  平行稱(chēng)量:建議進(jìn)行 2 次平行稱(chēng)量,若兩次結(jié)果偏差超過(guò) 0.5%,需重新稱(chēng)量,確保稱(chēng)量數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。
 
  定容環(huán)節(jié)
 
  溶解完全:將稱(chēng)量好的標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)移至容量瓶后,加入少量溶劑充分振搖或超聲,確保標(biāo)準(zhǔn)品完全溶解,無(wú)肉眼可見(jiàn)顆粒;生物類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)品(如蛋白、核酸)需輕柔顛倒混勻,避免劇烈震蕩導(dǎo)致活性失效。
 
  定容精準(zhǔn):待溶液溫度與室溫一致后,用溶劑緩慢加至容量瓶刻度線(xiàn),接近刻度時(shí)用膠頭滴管逐滴添加,確保凹液面與刻度線(xiàn)平齊;定容后顛倒容量瓶10~15 次,使溶液充分混勻。
 
  三、稀釋過(guò)程的核心注意事項(xiàng)
 
  稀釋梯度的選擇
 
  高濃度標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液需采用逐級(jí)稀釋法,避免直接稀釋導(dǎo)致濃度誤差,例如將 1000μg/mL 儲(chǔ)備液先稀釋至 100μg/mL 中間液,再稀釋至 10μg/mL 工作液。
 
  稀釋倍數(shù)不宜過(guò)大,單次稀釋倍數(shù)建議不超過(guò) 100 倍,若需極低濃度標(biāo)準(zhǔn)液,可分多次小倍數(shù)稀釋。
 
  稀釋操作細(xì)節(jié)
 
  移取儲(chǔ)備液時(shí),移液槍槍頭需潤(rùn)洗2~3 次,減少掛壁損失;轉(zhuǎn)移后需用溶劑沖洗移液管內(nèi)壁,確保全部轉(zhuǎn)移至稀釋容器。
 
  稀釋過(guò)程中需邊加溶劑邊輕柔混勻,尤其是粘稠或易分層的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,避免局部濃度不均。
 
  稀釋后穩(wěn)定性核查
 
  部分標(biāo)準(zhǔn)品(如維生素、農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)品)的工作液穩(wěn)定性較差,需現(xiàn)配現(xiàn)用;若需短期保存,需在證書(shū)規(guī)定條件下儲(chǔ)存,并在使用前核查其外觀(guān)(無(wú)渾濁、沉淀、變色)。
 
  四、配制后的儲(chǔ)存與記錄注意事項(xiàng)
 
  儲(chǔ)存條件
 
  按標(biāo)準(zhǔn)品證書(shū)要求儲(chǔ)存,如生物類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)品需 - 20℃冷凍保存,有機(jī)類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)品可冷藏避光保存;儲(chǔ)存容器需密封,避免與橡膠塞等材質(zhì)接觸導(dǎo)致吸附。
 
  工作液建議分裝為單次使用量,避免反復(fù)解凍或開(kāi)啟導(dǎo)致污染和濃度變化。
 
  記錄留存
 
  做好配制記錄,內(nèi)容包括標(biāo)準(zhǔn)品名稱(chēng)、批號(hào)、證書(shū)編號(hào)、稱(chēng)量質(zhì)量 / 體積、溶劑種類(lèi)、配制濃度、稀釋梯度、配制日期、操作人員等,確保數(shù)據(jù)可追溯。
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